Browsing by Author "AMEYOUD, OUARDIA"

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    Mise au point et validation d’une méthode de dosage simultané de phénylalanine et de tyrosine par HPLC dans le plasma humain
    (Faculté de médecine université deTIZI OUZOU, 2017-07-23) AMEYOUD, OUARDIA; SEDDAOUI, MERIEM; BELKAID NAWAL; BENSISAID HASSAN
    Objectifs :optimiser et valider une méthode HPLC a été développée pour quantifiersimultanément les concentrations plasmatiques dela phénylalanine et de la tyrosine en utilisant la détection par fluorescence sans dérivatisation. Méthodes : Les protéines plasmatiques sont précipitées avec de l'acide trichloroacétique, la solution de dihydrogénophosphate est utilisée pour la séparation par HPLC en phase inverse « C8 ». Les deux acides aminés sont détectés et quantifiés en utilisant leur fluorescence naturelle à une excitation de 210 nm et des longueurs d'onde d'émission de 302 nm. Un protocole de validation est appliqué suivant la démarche harmonisé de validation proposé par le SFSTP en 2006. Résultats : La technique développée s’est avérée spécifique, linéaire, et exact dans l’intervalle [79.19 ; 300] μmol/l pour la phénylalanine et [68.85 ; 100] μmol/l pour la tyrosine avec un risque d’avoir au maximum 20% des mesures en dehors des limites d’acceptations fixées à [-15% ; +15%] pour la phénylalanine et33% des mesures en dehors des limites d’acceptations fixées à [-20% ; +20%] pour la tyrosine. Cela atteste la validité de la méthode utilisée et son aptitude à être appliquée en routine pour le diagnostic des PCU et des Tyrosinémie. Conclusion : La nouvelle méthode HPLC permet un dosage rapide et très sensible de la phénylalanine et de la tyrosine